診斷試劑基礎(chǔ)知識
診斷試劑基礎(chǔ)知識
ELISA 是一種免疫測定。免疫測定( immunoassay , IA )是應(yīng)用免疫學(xué)技術(shù)測定標(biāo)本的方法。
在臨床檢驗中主要通過抗原抗體反應(yīng)檢測體液中的抗體或抗原性物質(zhì)。
1.1 抗原抗原是能在機體中引起特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)??乖M(jìn)入機體后,可**機體產(chǎn)生抗體和引起細(xì)胞免疫。在免疫測定中,抗原是指能與抗體結(jié)合的物質(zhì)。能在機體中引起抗體產(chǎn)生的抗原多為分子量大于 5000 的蛋白質(zhì)。
小分子化合物在與大分子蛋白質(zhì)結(jié)合后能引起機體產(chǎn)生特異性抗體的,稱為半抗原( hapten )。例如某些激素、*物等??乖姆磻?yīng)性取決于抗原決定簇( antigenic determinant ),或稱為表位( epitope )。
一個抗原分子可帶有不同的決定簇。1.2 抗體1.2.1 抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白 (immunoglobulin,Ig) 。 Ig 分五類,即 IgG 、 IgA 、 IgM 、 IgD 和 IgE 。
與免疫測定有關(guān)的 Ig 主要為 IgG 和 IgM 。 Ig 由兩個輕鏈( L )和兩個重鏈( H )的單體組成。 Ig 的輕鏈?zhǔn)窍嗤?,有κ?kappa )和λ( Lambda )兩種型別。
五類 Ig 的重鏈結(jié)構(gòu)不同,這決定了它們的抗原性也不同。 IgG 和 IgM 的重鏈分別稱為γ( gamma )鏈和μ( mu )鏈。IgG 可被木瓜蛋白酶分解為三個區(qū)段,其中兩個相同的區(qū)段稱抗原結(jié)合片段( Fab )。每個 Fab 都保存結(jié)合抗原的能力,但只有一個抗原結(jié)合位點,是單價的,與抗原結(jié)合后不出現(xiàn)凝集或沉淀。
另一區(qū)段稱 Fc 段,無抗體活性,但具有 IgG 特有的抗原性。IgG 可被胃蛋白酶分解為兩個片段,一個 Fab 雙體,稱 F ( ab\’ ) 2 ,能和兩個相同的抗原結(jié)合;另一片段類似 Fc ,隨后被分解成小分子多肽,無生物活性。IgM 是由五個單體組成的五聚體,含 10 個重鏈和 10 個輕鏈,具有 10 個抗原結(jié)合價,由于空間位置的影響,只表現(xiàn)為五個抗原結(jié)合價。 IgM 分子量約為 900000 , IgG 分子量約為 150000 。
機體被微生物感染后,先產(chǎn)生 IgM 抗體,然后產(chǎn)生 IgG 抗體。經(jīng)過一段時間, IgM 抗體量逐漸減少而消失,而 IgG 抗體可長期存在,在疾病痊愈后可持續(xù)數(shù)年之久。IgM 抗體一般為保護(hù)性抗體,具有免疫性。因此 IgM 抗體的測定,對某些傳染病如甲型肝炎有較高的臨床診斷價值。
1.2.2 抗體的產(chǎn)生機體受抗原**后, B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。含有抗體的血清稱為抗血清( antiserum )。每一系 B 細(xì)胞只產(chǎn)生針對某一抗原決定簇的抗體。
如將多種抗原或含有多個抗原決定簇的抗原注入機體,則將由多系的 B 細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的多種抗體,這些抗體均存在于免疫血清中。免疫測定中所用的抗血清一般用抗原免疫兔、羊或馬制得。產(chǎn)生抗體的 B 細(xì)胞可在體外與繁殖力強的腫瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞。
將單個雜交瘤細(xì)胞分離,在體內(nèi)或體外培養(yǎng)而分泌的抗體單克隆抗體( monoclonal antibody , McAb 或 Mab )。單克隆抗體僅針對一種抗原決定簇,具有很高的特異性。單克隆抗體通常用抗原免疫小鼠制備。將免疫的脾細(xì)胞(含產(chǎn)生抗體的 B 細(xì)胞)與小鼠腫瘤細(xì)胞融合,分離雜交瘤細(xì)胞,接種于小鼠腹腔,產(chǎn)生的腹水中含有濃度很高的單克隆抗體。
1.3 抗原抗體反應(yīng)1.3.1 可逆性 抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡,其反應(yīng)式為: Ag+Ab → Ag · Ab 。 . 抗體的親和力( affinity )是抗原抗體間的固有結(jié)合力,可以平衡常數(shù) K 表示: K=[Ag · Ab] / [Ag][Ab] 。 Ag · Ab 的解離程度與 K 值有關(guān)。
高親和力抗體的抗原結(jié)合點與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合,兩者結(jié)合牢固,不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性,因此可用親和層析法來提純抗原或抗體。在抗血清中,特異性的 IgG 抗體僅占總 IgG 中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體,稱為親和層析純抗體,應(yīng)用于免疫測定中可得到更好的效果。
1.3.2 最適比例 在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體復(fù)合物(沉淀)的量見圖 1-4 。曲線的高峰部分是抗原抗體比例最合適的范圍,稱為等價帶( zone of equivalence )。在等價帶前后分別為抗體過剩帶和抗原過剩帶。
如果抗原或抗體極度過剩,則無沉淀物形成,在免疫測定中稱為帶現(xiàn)象( zone phenomenon )。抗體過量稱為前帶( prezone ),抗原地過量稱為后帶( postzone )。在用免疫學(xué)方法測定?。
反滲透型號后面IG是什么意思
您好,陶氏反滲透膜**產(chǎn)品型號后面新增IG并無特殊的意義,只是新舊產(chǎn)品的區(qū)分符號。據(jù)陶氏公司解釋,在原有反滲透膜型號后綴IG替代以前的型號,兩者性能一樣,只是為了防止非法分子翻新舊的膜元件。
例如用BW30-400IG替代BW30-400,但兩者性能一樣,僅說明IG系列為新產(chǎn)品。
尿免疫球蛋白簡介
目錄 1 拼音 2 英文參考 3 概述 4 尿免疫球蛋白的醫(yī)學(xué)檢查 4.1 檢查名稱 4.2 分類 4.3 化驗取材 4.4 尿免疫球蛋白的測定原理 4.5 試劑 4.6 操作方法 4.7 正常值 4.8 化驗結(jié)果臨床意義 4.9 附注 4.10 相關(guān)疾病 1 拼音 niào miǎn yì qiú dàn bái 2 英文參考 urine immunoglobulin 3 概述 尿免疫球蛋白測定,對觀察慢性腎炎及腎病綜合征患者的病變程度和預(yù)后有一定價值;對診斷急性尿路感染及泌尿道疾病也有參考價值。收集24h尿送檢。
4 尿免疫球蛋白的醫(yī)學(xué)檢查 4.1 檢查名稱 尿免疫球蛋白 4.2 分類 體液和排泄物檢查 > 尿液檢查 4.3 化驗取材 尿液 4.4 尿免疫球蛋白的測定原理 單向免疫擴(kuò)散法:在含抗Ig血清的瓊脂板小孔中加入樣品,樣品中的相應(yīng)Ig向孔四周充分?jǐn)U散,與瓊脂板中的抗體形成肉眼可見的沉淀環(huán)。
沉淀環(huán)的直徑或面積與孔中相應(yīng)的Ig含量成正比。根據(jù)不同濃度Ig參考血清用同法測定所得結(jié)果繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出標(biāo)本中Ig含量。 4.5 試劑 (1)抗血清:抗人IgG、IgA、IgM血清,自制或市售。按照標(biāo)定效價,用生理鹽水稀釋后應(yīng)用。
(2)參考血清:以健康人混合血清分裝凍干制成,由專門單位供應(yīng)。每批經(jīng)**標(biāo)準(zhǔn)抗原進(jìn)行標(biāo)化,標(biāo)有各種Ig含量。 (3)質(zhì)控血清:用健康人血清配制,含高、中、低三種不同濃度的已知量Ig。
(4)瓊脂:優(yōu)質(zhì)瓊脂用生理鹽水配成24.0g/L,在沸水浴中融化后,加疊氮鈉至0.2g/L濃度防腐,分裝,4℃保存?zhèn)溆谩?(5)U型框架:厚1.5mm塑料或有機玻璃框架,其尺寸按玻璃板大小而定。 (6)其他材料:大小與框架相符的干凈玻璃板、孔徑為3mm的不銹鋼打孔器、彈簧夾以及有蓋搪瓷盤濕盒。
4.6 操作方法 使用單向免疫擴(kuò)散操作法。 4.7 正常值 IgG:<3ng/24h尿; IgA:<1ng/24h尿; IgM:?0ng/24h尿。 4.8 化驗結(jié)果臨床意義 升高:常見于慢性腎炎、腎病綜合征等。
出現(xiàn)IgM表示病情嚴(yán)重,預(yù)后差。尿中IgA增加,常見于腎盂腎炎、膀胱炎等。尿中IgG增加,常見于急性腎小球腎炎、慢性腎小球腎炎、尿毒癥、某些高血壓、肝硬化、甲狀腺功能亢進(jìn)癥、泌尿系統(tǒng)結(jié)石患者等。 4.9 附注 (1)國內(nèi)外均有測IgG、IgA、IgM現(xiàn)成的RID試劑盒供應(yīng),使用時務(wù)必嚴(yán)格按照各廠家的使用說明操作,以免出現(xiàn)差誤。
(2)在測輕鏈病或重鏈病患者血清時,需用重鏈抗血清及輕鏈κ型和λ型抗血清作進(jìn)一步鑒定,否則可能產(chǎn)生假象。 (3)某些免疫復(fù)合物疾病患者血清中可能存在著一些多聚體的Ig,可使結(jié)果偏低。
ig分子的基本結(jié)構(gòu)是什么
ig分子的基本結(jié)構(gòu)是:2條相同的重鏈和2條相同的輕鏈。Ig是免疫球蛋白(immunoglobulin)的縮寫。
免疫球蛋白(Ig)指具有抗體(Ab)活性或化學(xué)結(jié)構(gòu),與抗體分子相似的球蛋白。
免疫球蛋白是由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈通過鏈間二硫鍵連接而成的四肽鏈結(jié)構(gòu)。 抗體(antibody)是指機體由于抗原的**而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、**等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的百科血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個獨特特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原。
ig的基本結(jié)構(gòu)是什么
ig分子的基本結(jié)構(gòu)是由2條相同的重鏈和2條相同的輕鏈組成的四肽鏈結(jié)構(gòu)。
鑒于功能區(qū)具有同源性的特性,將Ig分子、T細(xì)胞抗原受體分子、MHC的I類和Ⅱ類抗原分子以及某些CD抗原分子等,統(tǒng)稱為Ig超家族。
由于細(xì)胞表面標(biāo)志、單克隆抗體以及基因工程技術(shù)的應(yīng)用,發(fā)現(xiàn)越來越多的膜表面分子和蛋白分子屬于Ig超家族。
主要包括T細(xì)胞、B細(xì)胞識別抗原受體及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子,免疫球蛋白重鏈和輕鏈,MHC抗原及相關(guān)分子,免疫球蛋白Fc段受體,某些細(xì)胞因子受體,與神經(jīng)系統(tǒng)功能和粘附有關(guān)的分子,某些粘附分子和分化抗原等。
ig分子
1966年發(fā)現(xiàn)的一類免疫球蛋白(Ig),分子量為188kD,血清中含量極低,僅占血清總Ig的0.002%,在個體發(fā)育中合成較晚。輕鏈與重鏈?zhǔn)怯啥蜴I連接形成一個四肽鏈分子稱為Ig分子的單體,是構(gòu)成免疫球蛋白分子的基本結(jié)構(gòu)。Ig單體中四條肽鏈兩端游離的氨基或羧基的方向是一致的,分別命名為氨基端(N端)和羧基端(C端)。