高效液相色譜常用哪些檢測器
高效液相色譜常用哪些檢測器
最常用的檢測器是紫外吸收檢測器（UVD），用于有紫外吸收的物質(zhì)。其他的二極管陣列檢測器（DAD）可以掃描出一個3D光譜，它是在紫外檢測器基礎(chǔ)上改良出來的，用于多波長錯組分物質(zhì);示差折光檢測器（RID）和蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）都屬于**檢測器，可以檢出沒有紫外吸收的物質(zhì)。
還有熒光檢測器，用于可發(fā)出熒光的物質(zhì)。
擴展資料：
高效液相色譜法（High Performance Liquid?Chromatography?\\ HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。
高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。
該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。
高效液相色譜適宜于分離、分析高沸點、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質(zhì)，因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、*物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑，抗氧化劑、殺蟲劑、除莠劑的分析等物質(zhì)的分析。
常見的液相色譜柱檢測器是哪幾種？
光學(xué)類檢測器
1、紫外吸收檢測器（UVD）是目前HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測器。它的主要特點是靈敏度高，線性范圍寬，對流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫。
它要求被檢測樣品組分有紫外吸收，屬于選擇性檢測器。
2、二極管陣列檢測器（PDAD）是20世紀80年代才出現(xiàn)的一種光學(xué)多通道檢測器，它可以看作是UVD的一個分支。在對每個洗脫組分進行光譜掃描，經(jīng)計算機處理后，得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜。其中吸收光譜用于定性（確證是否是單一純物質(zhì)），色譜用于定量，常用于復(fù)雜樣品（如生物樣品、中草*）的定性定量分析。
3、熒光檢測器（FLD）同樣屬于選擇性檢測器，其靈敏度在目前常用的HPLC檢測器中是**的，應(yīng)用也較多，僅次于UVD。
它適用于能激發(fā)熒光的化合物。很多與生命科學(xué)有關(guān)的物質(zhì)，如氨基酸、胺類、維生素、甾族化合物及某些代謝*物都可以用熒光法檢測。熒光檢測器在生物樣品痕量分析中很有用，尤其在用熒光衍生后，可以檢測很微量的氨基酸和肽。
通用型檢測器
1、示差折光檢測器（RID）是一種通用型檢測器，只要被測組分與洗脫液的折光指數(shù)有差別就可使用。生命科學(xué)中常遇到各類糖類化合物，沒有紫外吸收，一般常用示差折光檢測器。它的通用性比UVD廣，但靈敏度要低，對溫度變化敏感，并與梯度洗脫不相容，因而限制了它的使用。
2、蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）也是一種通用型的檢測器，可檢測揮發(fā)性低于流動相的任何樣品，而不需要樣品含有發(fā)色基團。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比，因而能用于測定樣品的純度或者檢測未知物。ELSD靈敏度比RID高，對溫度變化不敏感，基線穩(wěn)定，可用于梯度洗脫。
現(xiàn)在ELSD已被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、*物以及聚合物等的檢測。
3、質(zhì)譜檢測器（MSD）是另一種通用型檢測器，在靈敏度、選擇性、通用性及化合物的分子量和結(jié)構(gòu)信息的提供等方面都有突出的優(yōu)點。但它的昂貴操作費用和復(fù)雜性限制了它的推廣應(yīng)用。
高效液相色譜儀的常用檢測器有哪幾種，有什么區(qū)別嗎？
檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號，常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。
PDA檢測器：即紫外檢測器，點時間可檢測單一點處吸收值。
DAD檢測器：二極管陣列檢測器，可理解為無數(shù)個PDA檢測器串聯(lián)。
即點時間可檢測某一波段吸收值，比PDA檢測器定性能力強大。
熒光檢測器：對某些吸收紫外光后可發(fā)射熒光的物質(zhì)進行檢測，靈敏度較高。
蒸發(fā)光散射檢測器：可以檢測沒有紫外吸收的有機物質(zhì)（不可用于梯度洗脫）
示差折光檢測器：根據(jù)折射率的變化對樣品濃度檢測（不可用于梯度洗脫），**檢測器，但是定性能力和PDA一樣差。
1.紫外可見吸收檢測器(ultraviolet－visibledetector，UVD)
紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。
其特點是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強吸收物質(zhì)檢測限可達1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計相似，實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計。
(1)紫外吸收檢測器
紫外吸收檢測器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長，并安裝一個光柵型單色器，其波長選擇范圍寬(190nm～800nm)。
它有兩個流通池，一個作參比，一個作測量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上，若兩流通池都通過純的均勻溶劑，則它們在紫外波長下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強度相等，無信號輸出。當組分進入測量池時，吸收一定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強度不等，這時有信號輸出，輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。
局限：流動相的選擇受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相，每種溶劑都有截止波長，當小于該截止波長的紫外光通過溶劑時，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長。
(2)光電二極管陣列檢測器(photodiodearraydetector，PDAD)
也稱快速掃描紫外可見分光檢測器，是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時檢測由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號，然后對二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速決定具有**選擇性和靈敏度的波長。
單光束二極管陣列檢測器，光源發(fā)出的光先通過檢測池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使所有波長的光在接收器上同時被檢測。陣列式接收器上的光信號學(xué)的方法快速掃描提取出來，每幅圖象僅需要10ms，遠遠超過色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。
2．熒光檢測器(fluorescencedetector，F(xiàn)D)
熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進行熒光檢測。
其最小檢測濃度可達0.1ng／ml，適用于痕量分析;一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數(shù)量級，但其線性范圍不如紫外檢測器寬。近年來，采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測器極大地增強了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。
3.示差折光檢測器(differentialrefractiveIndexdetector，RID)
示差折光檢測器是一種濃度型通用檢測器，對所有溶質(zhì)都有響應(yīng)，某些不能用選擇性檢測器檢測的組分，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等，可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。
光從一種介質(zhì)進入另一種介質(zhì)時，由于兩種物質(zhì)的折射率不同就會產(chǎn)生折射。只要樣品組分與流動相的折光指數(shù)不同，就可被檢測，二者相差愈大，靈敏度愈高，在一定濃度范圍內(nèi)檢測器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。
4.電化學(xué)檢測器(elec)chemicaldetector，ED)
電化學(xué)檢測器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導(dǎo)等檢測器，屬選擇性檢測器，可檢測具有電活性的化合物。目前它已在各種無機和有機陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農(nóng)*及醫(yī)*等的測定中獲得了廣泛的應(yīng)用。
其中，電導(dǎo)檢測器在離子色譜中應(yīng)用最多。
電化學(xué)檢測器的優(yōu)點是：
①靈敏度高，最小檢測量～般為ng級，有目可達pg級;
②選擇性好，可測定大量非電活性物質(zhì)中極痕量的電活性物質(zhì);
③線性范圍寬，一般為4～5個數(shù)量級;
④設(shè)備簡單，成本較低;
⑤易于自動操作。
5.化學(xué)發(fā)光檢測器(c。
iluminescencedetector，CD)
化學(xué)發(fā)光檢測器是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器，因其設(shè)備簡單、價廉、線性范圍寬等優(yōu)點。其原理是基于某些物質(zhì)在常溫下進行化學(xué)反應(yīng)，生成處于激發(fā)態(tài)勢反應(yīng)中間體或反應(yīng)產(chǎn)物，當它們從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時，就發(fā)射出光子。由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來自化學(xué)反應(yīng)，故叫作化學(xué)發(fā)光。
當分離組分從色譜柱中洗脫出來后，立即與適當?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光試劑混合，引起化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射，其光強度與該物質(zhì)的濃度成正比。
這種檢測器不需要光源，也不需要復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng)，只要有恒流泵，將化學(xué)發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中，使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管將光信號變成電信號，就可進行檢測。這種檢測器的最小檢出量可達10-12g。
高效液相色譜儀推薦
安捷倫 島津 沃特斯 三大知名品牌島津：有很好的液相系統(tǒng)（硬件），但是操作軟件不盡人意（軟件）。安捷倫：操作軟件直觀，一學(xué)就會，但液相系統(tǒng)不如島津。
沃特斯：性價比較高。
其實哪款都一樣，從經(jīng)濟考慮，液相沒必要買太貴的百科。買液相要考慮幾個問題：低壓梯度還是高壓梯度？需要自動進樣器和柱溫箱嗎？紫外檢測器，DAD檢測器，紫外加熒光檢測器？以后有沒有可能接質(zhì)譜？常規(guī)色譜柱還是高效微柱，有很多需要明確的問題。買之前要做好功課的，一定要清楚自己買來干什么，然后是定配置，再參考預(yù)算定品牌。挨個公司要報價，開一個碰頭會，報價一攤牌，因為品質(zhì)都很接近，就比拼價格和服務(wù)了朋友可以到行業(yè)內(nèi)專業(yè)的網(wǎng)站進行交流學(xué)習(xí)！分析測試百科網(wǎng)這塊做得不錯，氣相、液相、質(zhì)譜、光譜、*物分析、化學(xué)分析、食品分析。
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